Details

Данная работа посвящена изучению ранее найденного производного бензопирана TRPC6-PAM-C20, чьи потенциальные нейропротекторные свойства требуют проверки ex vivo и in vivo методами. В ходе данной работы был проведен in vitro эксперимент по кальциевой визуализации для подтверждения селективности TRPC6-PAM-C20 в отношении TRPC6. Затем с использованием методов электрофизиологии было изучено влияние TRPC6-PAM-C20 на формирование долговременной потенциации на гиппокампальных срезах мозга мышей. Было также проанализировано влияние соединения на вес и выживаемость мышей при его систематическом введении. Далее были сформированы экспериментальные (получавшие инъекции TRPC6-PAM-C20) и контрольные группы мышей дикого типа и трансгенных 5xFAD мышей, которые подверглись комплексу поведенческих тестов: «условно-рефлекторное замирание», «открытое поле», «прогулка по перекладине». По завершении поведенческих тестов были приготовлены препараты срезов мозга данных мышей. Срезы подверглись иммуногистохимическому окрашиванию для оценки уровня накопления амилоида и степени выраженности астроглиоза в экспериментальных группах животных. Таким образом, полученные данные впервые демонстрируют, что TRPC6-PAM-C20 способен снижать нейропатологические признаки болезни Альцгеймера у мышей 5xFAD. Это открывает возможности для дальнейших доклинических и клинических исследований данного соединения.

This work is devoted to the study of a previously found benzopyrane derivative TRPC6-PAM-C20, whose potential neuroprotective properties require ex vivo and in vivo testing. In the course of this work, an in vitro calcium imaging experiment was carried out to confirm the selectivity of TRPC6-PAM-C20. Then the effect of TRPC6-PAM-C20 on the formation of long-term potentiation in hippocampal sections of the brain of mice was studied using electrophysiology methods. The effect of systematically administered compound on the weight and survival of mice was also analyzed. Next, there were formed experimental (TRPC6-PAM-C20 injections) and control groups of wild-type and transgenic 5xFAD mice, which were subjected to a battery of behavioral tests: "fear conditioning", "open field", "beam walk". After behavioral tests, there were prepared brain slices of these mice. The sections have undergone immunohistochemical staining to assess the level of amyloid accumulation and the degree of astrogliosis in experimental groups of animals. Thus, the findings demonstrate for the first time that TRPC6-PAM-C20 is able to reduce neuropathological signs of Alzheimers disease in 5xFAD mice. This opens up opportunities for further preclinical and clinical studies of this compound.