Details

Выпускная квалификационная работа посвящена исследованию конформационных изменений макромолекул методом ИК-Фурье спектроскопии. Объектом исследования выступил фибриллярный коллаген I типа, высушенный и нанесенный на металлическую подложку. В ходе подготовки образцов варьировались ключевые параметры, определяющие конечные свойства коллагеновых плёнок: кислотность (pH) среды, температура, ионная сила раствора, а также наличие сшивающего агента. Использована прикладная программа Origin. В рамках экспериментальной работы были получены спектры поглощения фибриллярного коллагена I типа. Для детального анализа молекулярной структуры исследовалась полоса Амида I, которая раскладывалась на отдельные компоненты, соответствующие различным типам вторичной структуры. В результате проведённого исследования установлены закономерности влияния внешних факторов на молекулярную организацию коллагеновых плёнок, а также на процесс фибриллогенеза, включая морфологию и размер формирующихся фибрилл. Полученные данные представляют значительный интерес для разработки in vitro организованных коллагеновых структур, обладающих свойствами, близкими к нативным.

The graduate thesis is devoted to the study of conformational changes in macromolecules using Fourier-transform infrared (FTIR) spectroscopy. The object of the study was fibrillar type I collagen, dried and deposited on a metal substrate. During sample preparation, key parameters determining the final properties of collagen films were varied, including the acidity (pH) of the medium, temperature, ionic strength of the solution, and the presence of a cross-linking agent. The Origin application was used. As part of the experimental work, absorption spectra of fibrillar type I collagen were obtained. For a detailed analysis of the molecular structure, the Amide I band was examined and decomposed into individual components corresponding to different types of secondary structure. The study established patterns of the influence of external factors on the molecular organization of collagen films, as well as on the fibrillogenesis process, including the morphology and size of the forming fibrils. The obtained data are of significant interest for the development of in vitro organized collagen structures with properties close to native ones.

• ВВЕДЕНИЕ
• 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • 1.1 Коллаген
  • 1.2. Вторичные структуры белка
  • 1.3. ИК-Фурье спектроскопия
  • 1.4. Влияние внешних факторов на вторичную структуру коллагена
    • 1.4.1 Влияние pH на вторичную структуру
    • 1.4.2 Влияние обработки коллагена на его вторичную структуру
    • 1.4.3 Влияние температуры на вторичную структуру
  • 2.1. ИК-Фурье спектрометр
    • 2.1.1. Интерферометр
    • 2.1.2 Детектирование и преобразование интерферограммы в спектр поглощения
    • 2.1.3. Приставка МНПВО
    • 2.1.4. ИК-Фурье спектрометр Simex FT-801
  • 2.2. Подготовка образцов
    • 2.2.1. Подготовка образцов для определения влияния внешних факторов на молекулярную структуру коллагена
• 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
  • 3.1. Влияние ионной силы на молекулярную структуру коллагена
  • 3.2. Влияние pH на молекулярную структуру коллагена
  • 3.3. Влияние температуры на молекулярную структуру коллагена
  • 3.4. Влияние сшивающего агента на молекулярную структуру коллагена
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ
• СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ