Details

Данная работа посвящена анализу противовирусной активности новых производных пиразоло[3,4-d]пиримидина на модели энтеровирусной инфекции в пермиссивных культурах клеток. В работе использовали следующие методы: определение инфекционного титра вируса, МТТ-тест для оценки цитотоксичности (CC₅₀) и цитопротективной активности (EC₅₀) соединений, тест на снижение продукции вирусного потомства. Скрининг противовирусной активности библиотеки из 12 соединений выполняли с использованием вирусов Коксаки А16, А21, В3 (штамм Nancy, устойчивый к плеконарилу), В4, В5, ECHO3 и ECHO30 на клеточных линиях Vero и RD. Статистическую обработку данных осуществляли с применением программного обеспечения GraphPad Prism 8.0. Выявлено, что соединения различались по токсичности (CC₅₀ от <0,6 до >100 мкг/мл). Только соединение 10475 проявило высокую активность против вируса Коксаки В3 (EC₅₀ = 1,2 мкг/мл, SI = 98) и подавляло репродукцию плеконарил-устойчивого штамма. Спектр противовирусной активности 10475 был узким: умеренное действие против Коксаки В4/В5, отсутствие активности против ECHO3/ECHO30, А16 и А21. Полученные данные могут быть использованы для доклинических исследований соединения 10475 как потенциального препарата для терапии коксакивирусной инфекции, а также для направленного синтеза более активных производных пиразоло[3,4-d]пиримидина.

This work is devoted to the analysis of the antiviral activity of new pyrazolo[3,4-d]pyrimidine derivatives in a model of enterovirus infection in permissive cell cultures. The following methods were used: determination of the virus infectious titer, MTT assay to evaluate the cytotoxicity (CC₅₀) and cytoprotective activity (EC₅₀) of the compounds, and a test for the reduction of viral progeny production. A screening of 12 compounds was performed against Coxsackieviruses A16, A21, B3 (Nancy strain, resistant to pleconaril), B4, B5, as well as ECHO3 and ECHO30, on Vero and RD cell lines. During the work, GraphPad Prism 8.0 software was used for statistical analysis and concentration calculations. It was found that the compounds differed in their toxicity (CC₅₀ ranging from <0.6 to >100 µg/mL). Only compound 10475 showed high activity against Coxsackievirus B3 (EC₅₀ = 1.2 µg/mL, SI = 98) and suppressed the replication of the pleconaril-resistant strain. The spectrum of 10475 is narrow: moderate activity against Coxsackieviruses B4/B5, and no activity against ECHO3/ECHO30, A16, or A21. The obtained data can be used for preclinical studies of compound 10475 as a potential anti-enteroviral agent, as well as for the targeted synthesis of new, more active pyrazolo[3,4-d]pyrimidine derivatives.