Details

Данная работа посвящена изучению динамики морфо-функциональных свойств эндометриальных стромальных клеток (эСК) человека в ходе культивирования. Показано, что первичные культуры эСК гетерогенны, в них присутствует большое количество β-gal положительных клеток округлой и полигональной морфологии. Однако, с 4 пассажа культура представлена лишь пролиферативно активными фибробластоподобными клетками, которые не характеризуются активностью β-gal. Методами проточной цитометрии, ПЦР-РВ и иммуноцитохимии было обнаружено, что с момента получения первичной культуры эСК и далее изменений в экспрессии CD146, CD140b и СD-маркеров, характерных для мультипотентных мезенхимных стромальных клеток, не наблюдалось. В то же время доля SUSD2+ клеток уменьшалась не менее, чем на 55 процентов за первые 6 пассажей. Уровни экспрессии генов, кодирующих рецепторы к эстрогенам (ESR1) и прогестерону (PGR) в процессе культивирования снижались в разы. Это соотносилось с потерей способности культур децидуализироваться в ответ на стимуляцию эстрадиолом (Е2) и медроксипрогестерона ацетатом (МПА) при культивировании более 3 пассажей. Таким образом, функциональные свойства культур эСК на разных пассажах существенно отличаются, что делает возможным моделирование гормонозависимых процессов только на первичных и ранних культурах эСК.

This study focuses on the dynamics of the morpho-functional properties of human endometrial stromal cells (eSCs) during cultivation. It was shown that primary eSC cultures are heterogeneous and contain a large number of β-gal-positive cells with round and polygonal morphology. However, from passage number 4 onward, the culture consists exclusively of proliferatively active, fibroblast-like cells that lack β-gal activity. Flow cytometry, RT-PCR, and immunocytochemistry revealed no changes in the expression of CD146, CD140b, and typical multipotent mesenchymal stromal cell surface markers from the isolation of primary eSC cultures throughout subsequent passages. At the same time, the proportion of SUSD2⁺ cells decreased by at least 55 percent over the first six passages. The expression levels of genes encoding estrogen receptor (ESR1) and progesterone receptor (PGR) decreased several-fold during cultivation. These changes were associated with the reduced ability of cultured cells to decidualize in response to estradiol (E2) and medroxyprogesterone acetate (MPA) after passage 3. Thus, the functional properties of eSC cultures vary significantly across different passages, indicating that modeling of hormone-dependent processes is possible only when using primary and early-passage eSC cultures.