Details

Данная работа посвящена изучению возможных изменений проводящих свойств механоуправляемых каналов Piezo1 при разрушении актинового цитоскелета. Исследуемые каналы являются важными механотрансдукторами. Целью работы является изучение проводящих свойств Yoda1-индуцированных ионных каналов Piezo1 на уровне одиночных токов после добавления к клеткам ЦитД. Была подобрана адекватная клеточная модель, подходящая для запланированных экспериментов, культивируемая линия клеток меланомы человека SK-MEL-2. Это позволило нам провести эксперименты, направленные на исследование проводящих свойств Piezo1, активированных селективным агонистом Yoda1, при деструкции актинового цитоскелета ЦитД. Мы обнаружили, что добавление ЦитД приводило к снижению амплитуды и уменьшению проводимости Yoda1–активированных Piezo1 каналов. С помощью флуоресцентной пробы SiR-actin kit, было подтверждено, что снижение амплитуды Piezo1 совпадает с временной динамикой разрушения актинового цитоскелета. Результаты демонстрируют новый механизм регуляции фундаментальных свойств Piezo1 в живых клетках, связанный с состоянием актиновых структур.

This work is devoted to studying possible changes in the conductive properties of mechanosensitive Piezo1 channels upon disruption of the actin cytoskeleton. The channels under study are important mechanotransducers. The aim of the work is to study the conductive properties of Yoda1-induced Piezo1 ion channels at the single-channel level after addition of cytochalasin D (CytD) to cells. An adequate cell model suitable for the planned experiments was selected — the cultured human melanoma cell line SK-MEL-2. This allowed us to conduct experiments aimed at investigating the conductive properties of Piezo1 activated by the selective agonist Yoda1 during actin cytoskeleton disruption by CytD. We found that the addition of CytD led to a decrease in the amplitude and conductance of Yoda1-activated Piezo1 channels. Using the SiR-actin kit fluorescent probe, it was confirmed that the decrease in Piezo1 amplitude coincides with the temporal dynamics of actin cytoskeleton disruption. The results demonstrate a novel mechanism for regulating the fundamental properties of Piezo1 in living cells, associated with the state of actin structures.