Details

Данная работа посвящена получению и исследованию свойств комплекса Smc-ScpAB бактерии M. gallisepticum. Белковые комплексы семейства SMC играют важную роль в организации бактериальной хромосомы и участвуют в процессах компактизации и сегрегации ДНК. Несмотря на значительное количество исследований комплексов SMC у различных бактерий, свойства комплекса Smc-ScpAB у M. gallisepticum остаются практически неизученными. В ходе работы были амплифицированы гены smc, scpA и scpB M. gallisepticum и получены плазмидные конструкции для экспрессии соответствующих белков. Полученные конструкции были трансформированы в клетки E. coli, после чего была проведена проверка корректности клонирования методом ПЦР-скрининга и секвенирования. Далее была осуществлена экспрессия белков Smc, ScpA и ScpB и проведено их выделение с использованием хроматографических методов. В результате работы были получены очищенные белки комплекса Smc-ScpAB, проведена сборка комплекса и начато исследование его свойств. Полученные результаты могут способствовать дальнейшему изучению механизмов функционирования бактериальных комплексов SMC и их роли в организации генетического материала клетки.

The given work is devoted to obtaining and studying the properties of the Smc-ScpAB complex of the bacterium M. gallisepticum. Protein complexes of the SMC family play an important role in the organization of the bacterial chromosome and participate in the processes of DNA compaction and segregation. Despite a significant number of studies on SMC complexes in various bacteria, the properties of the Smc-ScpAB complex in M. gallisepticum remain largely unexplored. During the work, the genes smc, scpA and scpB of M. gallisepticum were amplified and plasmid constructs for the expression of the corresponding proteins were obtained. The resulting constructs were transformed into cells of Escherichia coli, after which the correctness of cloning was verified by PCR screening and sequencing. Subsequently, the expression of the Smc, ScpA, and ScpB proteins was carried out, and their purification was performed using chromatographic methods. As a result of this work, purified proteins of the Smc-ScpAB complex were obtained, the complex was assembled, and the study of its properties was initiated. The obtained results may contribute to further investigation of the mechanisms of bacterial SMC complex functioning and their role in the organization of the genetic material of the cell.