Details

Данная работа посвящена исследованию влияния активации провоспалительного пути сGAS-STING на депо-управляемый вход кальция. Задачи, которые решались в ходе исследования: а) Охарактеризовать депо-управляемый вход кальция при активации STING его природным (сGAMP) и синтетическим (diABZI) агонистом. б) Оценить избирательность влияния активации STING на ORAI- и TRPC1-содержащие депо-управляемые каналы. в) Охарактеризовать перераспределение активатора депо-управляемых каналов белка STIM1 в клетке при активации STING. г) Оценить влияние количества белка STIM1 в клетке на депо-управляемый вход кальция в условиях активации STING. Объект исследования – Механизм депо-управляемого входа кальция и сигнальный путь cGAS-STING. Работа выполнена на базе лаборатории ионных каналов клеточных мембран (ИККМ) ИНЦ РАН. Анализируемыми показателями были амплитуда депоуправляемого входа кальция, амплитуда ионного тока, интенсивность свечения блоттов В ходе исследования было определено: а) Активация STING подавляет STIM1-зависимую компоненту депо-управляемого входа кальция в клетку. б) Активация STING избирательно подавляет TRPC1-STIM1-заисимую компоненту депо-управляемого входа кальция. в) При активации STING наблюдается частичное перераспределение STIM1 в область аппарата Гольджи. г) Баланс STIM1 и STING в клетке определяет депо-управляемый кальциевый ответ при активации STING.

This work is devoted to the study of the effect of activation of the proinflammatory pathway cGAS-STING on store-operated calcium entry. The tasks of the study: а) Characterize store-operated calcium entry upon activation of STING by its natural (cGAMP) and synthetic (diABZI) agonists. b) Assess the selectivity of STING activation for ORAI- and TRPC1- containing storeoperated channels. c) Characterize the redistribution of the store-operated channel activator protein STIM1 within the cell upon STING activation. d) Assess the effect of STIM1 protein levels in the cell on store-operated calcium entry under STING activation conditions. The object of the study is the mechanism of store-operated calcium entry and the cGAS-STING signaling pathway. The work was carried out on the basis of the laboratory of ion channels of cell membranes at the institute of cytology of the russian academy of sciences. The analyzed parameters included the amplitude of store-operated calcium entry, the amplitude of the ion current and the intensity of blot fluorescence. The study revealed the following: a) STING activation suppresses the STIM1-dependent component of store-operated calcium entry into the cell. b) STING activation selectively suppresses the TRPC1-STIM1-dependent component of store-operated calcium entry. c) STING activation results in a partial redistribution of STIM1 to the golgi apparatus. d) The balance of STIM1 and STING in the cell determines the store-operated calcium response upon STING activation.