Details

Работа посвящена выявлению оптимальных условий культивирования клеточной линии CHO с учетом частоты пересева и выбора питательной среды путем установления зависимости жизнеспособности и динамики роста посевной культуры от указанных параметров. Задачи, которые решались в ходе исследования: Разработать и апробировать методику культивирования клеточной линии CHO в двух режимах пересева (каждые 2 и 4 суток) с использованием различных составов питательной среды. Установить влияние частоты пересева, питательной среды и температуры культивирования на рост и жизнеспособность клеток CHO. Оценить характер изменения физико-химических параметров культуральной жидкости в процессе культивирования. Проанализировать морфологические характеристики клеток методом оптической микроскопии при различных условиях культивирования. Провести математическую обработку экспериментальных данных и разработать рекомендации по оптимизации режима культивирования клеток CHO. Объект исследования –  клеточная культура СНО (Chinese Hamster Ovary). Работа выполнена на базе лаборатории биопроцессов отдела новых технологий ООО Гротекс (Solopharm). По итогам исследования рекомендовано использовать режим 1р/4 сут на среде А при температуре 37 °С для накопления биомассы до момента снижения жизнеспособности, а после перейти  на  режим 1р/2 сут на среде А (37 °С), чтобы поддерживать жизнеспособность клеток на финальных стадиях процесса. Для достижения данных результатов в работе были использованы следующие информационные источники: «PubMed», «Studfile», «Политех Электронная библиотека», «Киберленинка», в том числе программное обеспечение, облачные сервисы, базы данных и прочие. Для расчетов и оформления документов использовался пакет Google Workspace.

The work is devoted to the identification of optimal conditions for the cultivation of the CHO cell line, taking into account the frequency of re-sowing and the choice of nutrient medium by establishing the dependence of the viability and growth dynamics of the crop on these parameters. Tasks that were solved during the research: To develop and test a technique for cultivating the CHO cell line in two re-seeding modes (every 2 and 4 days) using different nutrient media compositions. To establish the influence of the frequency of re-sowing, nutrient medium and culture temperature on the growth and viability of CHO cells. To evaluate the nature of changes in the physico-chemical parameters of the culture fluid during cultivation. To analyze the morphological characteristics of cells by optical microscopy under various cultivation conditions. To carry out mathematical processing of experimental data and develop recommendations for optimizing the CHO cell culture regime. The object of the study is the CHO cell culture (Chinese Hamster Ovary). The work was performed on the basis of the bioprocess laboratory of the Department of new technologies of Grotex LLC (Solopharm). During the work, it is recommended to use the 1p/4 day mode on medium A    (37 °C) to accumulate biomass until viability decreases, and then switch to the 1p/2 day mode on medium A (37 °C) to maintain cell viability in the final stages of the process. To achieve these results, the following information sources were used in the work: “PubMed”, “Studfile”, “Polytechnic Electronic Library”, “Cyberleninca”, including software, cloud services, databases, and others. The Google Workspace package was used for calculations and paperwork.

• РЕФЕРАТ
• ABSTRACT
• ВВЕДЕНИЕ
• 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
  • 1.1. Строение, функции и применение моноклональных антител класса IgG
  • 1.2. Классификация моноклональных антител
  • 1.3. Характеристика особенностей культивирования клеток СНО
• 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
  • 2.1. Материалы исследования
  • 2.2. Методы исследований
  • 2.3. Схема проведения эксперимента
• 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ
  • 3.1 Первичное представление экспериментальных данных
• 3.2. Оценка жизнеспособности и концентрации живых клеток СНО
  • 3.2. Изменение скорости роста клеточной культуры СНО при разных температурах
  • 3.3. Влияние условий культивирования клеток СНО на изменение кислотно-щелочного баланса и концентрацию лактата в среде
  • 3.4. Морфологическая оценка клеточной культуры СНО
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ
• СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ