Details

Данная работа посвящена оценке действия модуляторов NKA (натрий-калиевая АФТаза) и SK (кальций-активируемые каналы  малой проводимости) каналов на эпилептиформные токи в культуре нейронов головного мозга крыс. Для этого сформулированы задачи — сначала провести исследования отдельного их влияния на синхронную активность (эпилептиформных токов и кальциевых транзиентов) в культуре, а затем их совместного действия. Исследование проводилось методами патч-кламп, а также измерения уровня внутриклеточной концентрации кальция. В процессе исследования была подтверждена способность модуляторов NKA (уабаина) и SK каналов (СуРРА) уменьшать эпилептиформные токи в модельной культуре. Однако было выявлено побочное действие вещества СуРРА при его отдельном применении в виде увеличения внутриклеточной концентрации кальция кальция, а также связанное с этим увеличение эпилептиформных токов при совместном применении исследуемых веществ. В дополнение к поставленным задачам, была опровергнута гипотеза о том, что выявленное побочное действие связано с работой SK каналов. Результаты данной диссертации могут быть использованы для дальнейших исследований перспективных противоэпилептических препаратов in vivo, а также для раскрытия механизмов выявленного побочного действия СуРРА на молекулярные механизмы нейронов.

This work is devoted to evaluating the effect of NKA (sodium-potassium ATPase) and SK (calium-activated potassium channels) channels modulators on epileptiform currents in rat brain neuron culture. For this purpose, the tasks are formulated — first to conduct research on its individual influence on synchronous activity (epileptiform currents and calcium transients) in culture, and then their joint action. The study was conducted using patch-clamp method, as well as calcium imaging. In the course of the study, the ability of NKA (ouabain) and SK- channel (CyPPA) modulators to reduce epileptiform currents in a model culture was confirmed. However, the accumulation of intracellular calcium side effect of CyPPA was revealed, as well as an associated increase of epileptiform currents with the combined use of the studied substances. In addition to the tasks set, the hypothesis that the identified side effect is related to SK channels was refuted. The results of this dissertation can be used for further studies of promising antiepileptic drugs in vivo, as well as to uncover the mechanisms of the revealed offtarget effect of CyPPA on the molecular mechanisms of the neurons.