Details

Работа выполнена на базе научно-исследовательского комплекса «Нано-биотехнологии» (НИК «НаноБио»). Объектом исследования выступали консервативные последовательности генов SARS-COV-2: RdRp, S-gene и N-gene. Целью работы являлась разработка и валидация ДНК-мишеней, которые обеспечивают чувствительность и специфичность результатов диагностиче-ских тестов. Данная работа направлена на выделение нужных консервативных участков из РНК SARS-COV-2, вставку генов в плазмиду pJet1.2 методом Гибсона и лигированием. Данное исследование актуально, поскольку совре-менная молекулярная диагностика опирается на высокочувствительные методы анализа, однако точность получаемых результатов напрямую зависит от каче-ства используемых мишеней. Практическая значимость работы заключается в возможности применения разработанных ДНК-стандартов в диагностических лабораториях для калибровки и валидации тест-систем, основанных на методе ПЦР. Использование стандартов позволит повысить чувствительность и точ-ность диагностики и снизить вероятность ложноположительных и ложноот-рицательных результатов. В результате данной работы были получены стан-дартные ДНК-мишени генов SARS-COV-2: RdRp, S-gene и N-gene. В качестве источников информации использовались научные базы дан-ных: PubMed, Google Scholar, National Library of Medicine. В ходе работы использовалось различное программное обеспечение: 1. Текстовый редактор: Microsoft Word. 2. Обработка графических данных: ImageJ. 3. Для создания праймеров: SnapGene.

The object of the study was the conserved gene sequences of SARS-CoV-2: RdRp, S-gene and N-gene. The aim is to develop and validate DNA targets that ensure the sensitivity and specificity of diagnostic test results. This work aims to isolate the required conserved regions from SARS-CoV-2 RNA, insert the genes into the pJet1.2 plasmid using the Gibson method and ligation. This research is relevant because modern molecular di-agnostics relies on highly sensitive analytical methods; however, the accuracy of the results obtained depends directly on the quality of the targets used. The practical sig-nificance of this work lies in the potential for the developed DNA standards to be used in diagnostic laboratories for the calibration and validation of PCR-based test systems. The use of these standards will improve the sensitivity and accuracy of di-agnosis and reduce the likelihood of false-positive and false-negative results. As a result of this work, standard DNA targets of SARS-COV-2 genes were obtained: RdRp, S-gene and N-gene. Scientific databases: PubMed, Google Scholar, National Library of Medicine were used as sources of information. Various software were used in the course of the work: 1.Text editor: Microsoft Word. 2. Graphic data processing: ImageJ. 3. To create primers: SnapGene. The work was carried out on the basis of the research complex “Nanobiotech-nology” (SRC “NanoBio”).