Детальная информация

В работе предложен подход к очистке рекомбинантных аденоассоци-иро-ванных векторов (rAAV) с помощью метода хроматографии на аффинном сор-бенте. Очистка рекомбинантных аденоассоциированных вирусных векторов ме-тодом хроматографии на аффинном сорбенте POROS CaptureSelect AAVX поз-воляет получать высокоочищенный препарат в одну стадию, а также масштаби-ровать процесс получения rAAV до пилотных и промышленных масштабов. Раз-работанные буферные системы обеспечивают сорбцию rAAV с матрицей сор-бента порядка 95%, а также обладают высокой элюирующей способностью, обеспечивающей выход порядка 40% по геном-содержащим частицам. В работе также исследована трансдуцирующая и цитотоксическая активность препаратов, полученных методом хроматографической очистки.

This work describimg the approach to purification of recombinant adeno-associated vectors (rAAV) using affinity chromatography. Purification of rAAV using affinity sorbent POROS CaptureSelect AAVX allows to obtain a highly purified preparation in one stage, and also to scale up the process to pilot and industrial level. It is shown that the developed buffer systems provide approximately 95% sorption of rAAV on matrix sorbent and have high eluting ability, providing a yield in the order of 40% for genome-containing particles. Transducing and cytotoxic activities of preparations ob-tained after chromatographic purification are also investigated.