Details
| Title | Разработка хроматографического метода выделения и очистки рекомбинантных адено-ассоциированных векторов (rAAV): выпускная квалификационная работа магистра: 16.04.01 - Техническая физика ; 16.04.01_10 - Медицинская биотехнология |
|---|---|
| Creators | Ребекин Марк Сергеевич |
| Scientific adviser | Писарев Олег Александрович |
| Other creators | Октябрьский Валерий Павлович |
| Organization | Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого. Институт биомедицинских систем и биотехнологий |
| Imprint | Санкт-Петербург, 2019 |
| Collection | Выпускные квалификационные работы ; Общая коллекция |
| Document type | Master graduation qualification work |
| Language | Russian |
| Level of education | Master |
| Speciality code (FGOS) | 16.04.01 |
| Speciality group (FGOS) | 160000 - Физико-технические науки и технологии |
| Rights | Текст не доступен в соответствии с распоряжением СПбПУ от 13.07.2016 № 91 |
| Record key | ru\spstu\vkr\2955 |
| Record create date | 10/9/2019 |
В работе предложен подход к очистке рекомбинантных аденоассоци-иро-ванных векторов (rAAV) с помощью метода хроматографии на аффинном сор-бенте. Очистка рекомбинантных аденоассоциированных вирусных векторов ме-тодом хроматографии на аффинном сорбенте POROS CaptureSelect AAVX поз-воляет получать высокоочищенный препарат в одну стадию, а также масштаби-ровать процесс получения rAAV до пилотных и промышленных масштабов. Раз-работанные буферные системы обеспечивают сорбцию rAAV с матрицей сор-бента порядка 95%, а также обладают высокой элюирующей способностью, обеспечивающей выход порядка 40% по геном-содержащим частицам. В работе также исследована трансдуцирующая и цитотоксическая активность препаратов, полученных методом хроматографической очистки.
This work describimg the approach to purification of recombinant adeno-associated vectors (rAAV) using affinity chromatography. Purification of rAAV using affinity sorbent POROS CaptureSelect AAVX allows to obtain a highly purified preparation in one stage, and also to scale up the process to pilot and industrial level. It is shown that the developed buffer systems provide approximately 95% sorption of rAAV on matrix sorbent and have high eluting ability, providing a yield in the order of 40% for genome-containing particles. Transducing and cytotoxic activities of preparations ob-tained after chromatographic purification are also investigated.
