Целью работы было исследование физиологического воздействия лигандов рЭФР (ЭФР, ТФР‑α, АР) на внутриклеточную судьбу лиганд‑рецепторных комплексов, пролиферацию и дифференцировку энМСК в сравнении с клетками опухолевого происхождения HeLa. Для решения задач исследования использовали методы флуоресцентной конфокальной микроскопии, SDS‑электрофореза и иммуноблотинга, проточной цитометрии, а также иммуноферментного анализа. Показано, что, в отличие от ЭФР и ТФР‑α, АР не вызывает интернализации рЭФР как в энМСК, так и в HeLa. В энМСК динамика эндоцитоза и лизосомной деградации под действием ЭФР и ТФР‑α замедлена по сравнению с HeLa. Также обнаружено, что АР не влияет на пролиферацию в энМСК, тогда как ЭФР и ТФР‑α ее ускоряют. Опухолевые клетки, напротив, быстрее пролиферируют в присутствии АР. Выявлено, что рецептор-опосредуемые сигнальные пути, стимулируемые ЭФР и ТФР‑α, приводят к подавлению децидуальной дифференцировки энМСК. Интересно, что МСК из эндометрия и плаценты, а также эстроген-зависимые опухолевые клетки, в отличие от МСК из пульпы зуба и Вартонова студня секретируют АР в среду. В работе впервые описано функционирование канонической сигнальной системы рЭФР в энМСК, что создает более полное представление как о физиологии клеток, способных воспринимать эти сигналы в ходе пролиферации и дифференцировки. Кроме того, эти клетки могут быть использованы в качестве модели сигнальных процессов, протекающих в нормальных нетрансформированных клетках в тканеспецифичном контексте. В совокупности эти данные могут быть использованы для разработки новых подходов в терапии патологий эндометрия.
The aim of the work was to study the physiological effect of EGFR ligands (EGF, TGF‑α, AR) on the intracellular fate of ligand-receptor complexes, as well as proliferation and differentiation of enMSCs in comparison with cells of tumor origin HeLa. In the study the methods of fluorescence confocal microscopy, SDS electrophoresis and immunoblotting, flow cytometry, and enzyme‑linked immunoassay were used.It was shown that, unlike EGF and TGF‑α, AR does not cause internalization of EGFR both in enMSCs and in HeLa. In enMSCs, the dynamics of endocytosis and lysosomal degradation under the action of EGF and TGF‑α is slower than in HeLa. It was also found that AR does not affect proliferation in enMSCs, while EGF and TGF‑α accelerate it. Tumor cells, on the contrary, proliferate faster in the presence of AR. It was found that receptor-mediated signaling pathways stimulated by EGF and TGF‑α lead to the suppression of decidual differentiation of enMSCs. Interestingly, MSCs from the endometrium and placenta, as well as estrogen‑dependent tumor cells, unlike MSCs from the dental pulp and Wharton's jelly, secrete AR into the medium. The study describes for the first time the functioning of the canonical EGFR signaling system in enMSCs, which creates a more complete understanding of the physiology of stromal cells that are able to perceive these signals during proliferation and differentiation. In addition, these cells can be used as a model of signaling processes occurring in normal non-transformed cells in a tissue‑specific context. Together, these data can be used to develop new approaches in the treatment of endometrial pathologies.
