Разработаны методы синтеза супрамолекулярных нанокомплексов на основе химотрипсина (ХТ) и наночастиц биогенных элементов (Se и Ag). Методами УФ- и видимой спектрофотометрии, динамического светорассеяния и просвечивающей электронной микроскопии изучены спектральные и размерные свойства синтезированных нанокомплексов. Исследована агрегативная стабильность нанокомплексов в широком диапазоне рН среды и определены рН интервалы для их практического использования. Изучена зависимость размерных характеристик НЧ-Ag от времени введения ХТ в реакционную смесь после начала реакции синтеза. Исследована протеолитическая активность ХТ, иммобилизованного на НЧ-Se и НЧ-Ag, при рН 6.0, 8.0 и 11.0. Показано, что в сравнении с нативным ферментом иммобилизация ХТ на НЧ-Se приводила к сдвигу оптимума рН протеолитической активности фермента в сильно щелочную область, а иммобилизация ХТ на НЧ-Ag – к повышению его протеолитической активности в кислой и сильно щелочной средах. Определена минимальная концентрация НЧ-Ag, стабилизированных ХТ (0.01 масс. %), при которой наблюдалось подавление роста микроорганизмов.
Methods for the synthesis of supramolecular nanocomplexes based on chymotrypsin (CT) and biogenic (Se and Ag) nanoparticles (NPs) have been developed. The spectral and dimensional properties of the synthesized nanocomplexes were studied by the methods of UV- and visible spectrophotometry, dynamic light scattering, and transmission electron microscopy. The aggregative stability of nanocomplexes in a wide pH range of the medium was studied and pH ranges for their practical use were determined. The dependence of the size characteristics of AgNPs on the time of the introduction of CT into the reaction mixture after the start of the synthesis reaction was studied. The proteolytic activity of CT immobilized on SeNPs and AgNPs was studied at pH 6.0, 8.0, and 11.0. It was shown that in comparison with the native enzyme CT immobilization on SeNPs led to the shift in the pH optimum of the proteolytic activity of the enzyme to a strongly alkaline region, and CT immobilization on AgNPs led to an increase in its proteolytic activity in acidic and strongly alkaline media. The minimum concentration of AgNPs stabilized by CT at which microorganism growth was suppressed was determined (0.01 wt%).
