Details

На сегодняшний день ПЦР-анализ один из самых востребованных методов исследования в России. Он довольно часто используется для диагностики инфекционных и вирусных заболеваний. Этот метод базируется на выявлении нуклеиновых кислот в интересующем нас биологическом материале. В настоящее время в мире активно растет заболеваемость вирусными гепатитами, но многие узнают о заболевании довольно поздно, потому что они могут протекать бессимптомно. В связи с этим появилась необходимость разработать тест-систему для ранней диагностики вируса Гепатита С, а также проанализировать её аналитические и диагностические характеристики. Целью данной работы является определение аналитических характеристик и оценка работоспособности разработанной тест-системы для выявления РНК вируса гепатита С. Задачи, которые решались в ходе исследования: •Провести аналитический обзор литературы по теме исследования •Определить аналитическую чувствительность тест-системы •Проверить воспроизводимость результатов, полученных при использовании набора, определить прецизионность системы. •Проверить влияние ошибки при выполнении анализа на эффективность системы, определить робастность системы. •Проанализировать влияние замены сырья на характеристики тест-системы. Объекты исследования данной работы – синтетические фрагменты РНК вируса гепатита С с точным числом копий, которые служат для проверки и отработки разработанного набора с целью установления работоспособности системы и проведением дальнейших исследований на соответствие заданным критериям. При выполнении литературного обзора использовались следующие базы данных: eLIBRARY.RU, Elsevier ScienceDirect, Scopus, PubMed, NCBI. Статистическую обработку экспериментальных данных осуществляли с использованием программного обеспечения Microsoft Excel и программного обеспечения амплификатора LightCycler 96 (Roche).

Today, PCR analysis is one of the most popular research methods in Russia. It is quite often used to diagnose infectious and viral diseases. This method is based on the identification of nucleic acids in the biological material of interest to us. Currently, the incidence of viral hepatitis is actively growing in the world, but many will learn about the disease quite late, because they may be asymptomatic. In this regard, it became necessary to develop a test system for early diagnosis of hepatitis C virus, as well as analyze its analytical and diagnostic characteristics. The purpose of this work is to determine the analytical characteristics and assess the performance of the developed test system for the detection of hepatitis C virus RNA. The tasks that were solved during the study: •Conduct an analytical review of the literature on the research topic •Determine the analytical sensitivity of the test system •Check the reproducibility of the results obtained using the kit, determine the precision of the system. •Check the impact of the error during the analysis on the efficiency of the system, determine the robustness of the system. •Analyze the impact of raw material replacement on the performance of the test system. The objects of research of this work are synthetic fragments of hepatitis C virus RNA with an exact number of copies, which are used to check and work out the developed set-in order to establish the operability of the system and conduct further studies for compliance with the specified criteria. The following databases were used in the literary review: eLIBRARY.RU, Elsevier ScienceDirect, Scopus, PubMed, NCBI. Statistical processing of experimental data was performed using Microsoft Excel software and amplifier software LightCycler 96 (Roche).