Details

Данная работа посвящена созданию мультиплексной системы на основе ПЦР-РВ для диагностики муковисцидоза, вызванного мутацией F508del, и исследованию характеристик системы. Задачи, решаемые в ходе исследования: 1. Провести обзор литературы по этиологии и патогенезу муковисцидо-за, методам диагностики и терапии заболевания и роли мутации F508del в развитии заболевания. 2. Создать мультиплексную систему детекции аллелей F508del с включе-нием внутреннего контрольного образца. 3. Оценить характеристики системы при хранении и транспортировке. 4. Проверить прецизионность предложенной системы. 5. Определить робастность системы. Работа проведена на базе лаборатории молекулярной диагностики ООО «Вега», входящей в ГК «Алкор Био». В результате была создана мульти-плексная система с включением внутреннего контрольного образца для определения мутации F508del в гене CFTR. Созданная система может ис-пользоваться для диагностики муковисцидоза после прохождения процеду-ры регистрации. Для достижения данных результатов в работе были использованы сле-дующие информационные технологии, в том числе современные базы дан-ных в области молекулярной билогии и генетики NCBI, GenBank, eLIBRARY.RU, Scopus, а также программное обеспечение для анализа ре-зультатов для анализа и обработки результатов: Microsoft Excel, CFX Maestro, ImageLab, IDT OligoAnalyzer, PrimerBlast.

This work covers the development of a multiplex system based on RT-PCR for diagnosing cystic fibrosis caused by the F508del mutation and the study of the characteristics of this system during operation and storage. The tasks solved during the study: 1. To review the literature on the etiology and pathogenesis of cystic fibro-sis, methods of diagnosis and therapy of the disease and the role of the F508del mutation in the development of the disease. 2. To create a multiplex system for detecting F508del alleles with the inclu-sion of an internal control sample. 3. To evaluate the characteristics of the system during storage and transpor-tation. 4. To test the precision of the proposed system. 5. To determine the robustness of the system. The work was carried out at the Laboratory of Molecular Diagnostics of Ve-ga LLC, part of the Alkor Bio Group of Companies. As a result, a multiplex sys-tem was created with the inclusion of an internal control sample for determining the F508del mutation in the CFTR gene. The created system can be used to diag-nose cystic fibrosis after passing the registration procedure. To achieve these results, the following information technologies were used in the work, including modern databases in the field of molecular biology and genet-ics NCBI, GenBank, eLIBRARY.RU, Scopus, as well as software for analyzing the results for analyzing and processing the results: Microsoft Excel, CFX Maes-tro, ImageLab, IDT OligoAnalyzer, PrimerBlast.

• ВВЕДЕНИЕ
• 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
  • 1.1. Муковисцидоз: клинико-генетическая характеристика
    • 1.1.1. Неонатальная диагностика муковсицидоза
    • 1.1.2. Симптоматические проявления муковисцидоза
    • 1.1.3. Генетическая детерминанта муковисцидоза, функция белка CFTR
    • 1.1.4. Мутации в белке CFTR и их влияние на тяжесть протекания заболевания
  • 1.2. Характеристика мутации F508del
• ЗАКЛЮЧЕНИЕ
• СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
• ПРИЛОЖЕНИЕ А
• ПРИЛОЖЕНИЕ Б