Details

Диссертационная работа посвящена исследованию ранних стадий инфекции гигантского бактериофага phiKZ у Pseudomonas aeruginosa. Особое внимание уделено уникальной внутриклеточной структуре — мембранной везикуле ранней фаговой инфекции (ранее называемой круговым компартментом), формирующейся сразу после инъекции фагового генома. С помощью методов флуоресцентной микроскопии и использования рекомбинантных белков, слитых с флуоресцентными белками, показано, что мембранная везикула содержит ДНК фага и вирионную РНК-полимеразы, обеспечивая защиту генома от бактериальных иммунных систем и транскрипцию ранних генов. На следующем этапе везикула транспортируется к формирующемуся фаговому ядру, где происходит передача ДНК, а невирионная РНК-полимераза перераспределяется в фаговое ядро и начинает транскрипцию поздних генов. Таким образом, работа раскрывает новый механизм регуляции экспрессии фаговых генов, основанный на пространственном разделении вирусных РНК-полимераз.

The dissertation is devoted to the study of the early stages of infection of the giant bacteriophage phiKZ in Pseudomonas aeruginosa. Particular attention is given to a unique intracellular structure—the membrane vesicle of early phage infection (formerly referred to as the circular compartment), which is formed immediately after phage genome injection. Using fluorescence microscopy and recombinant proteins fused with fluorescent markers, it was shown that the vesicle contains phage DNA and the virion RNA polymerase, thereby protecting the genome from bacterial immune systems and enabling the transcription of early genes. At the next stage, the vesicle is transported to the forming phage nucleus, where the DNA is transferred, while the non-virion RNA polymerase is redistributed into the phage nucleus and initiates transcription of late genes. Thus, the study reveals a novel mechanism of phage gene expression regulation based on the spatial separation of viral RNA polymerases.