Details

Большой прогресс последних десятилетий в генетике и молекулярной биологии дал развитие множеству методов генной терапии, направленных на коррекцию тех или иных заболеваний человека. Генотерапевтическая модель, описываемая в работе, представляет из себя систему, основанную на использовании стволовых клеток, а также искусственной хромосомы человека в качестве вектора, несущего терапевтический трансген. Целью работы являлось получение и характеризация линий индуцированных плюрипотентных стволовых клеток мышей, деффектных по гену дисферлина для дальнейшего генотерапевтического использования. Были получены плюрипотентные стволовые клетки из первичных фибробластов мутантных по гену дисферлина мышей (Dysf-/-), полученные клоны и ПС клеток экспрессировали эндогенный фактор Oct4, и были способны развиваться в ткани всех зародышевых листков, что свидетельствовало о их полном репрограммировании и плюрипотентности. Показано, что ранее сконструированная искусственная хромосома, несущая рекомбинантный дисферлин, не интегрирована в геном донорных СНО клеток, стабильно экспрессирует целевой белок и может быть использована для переноса в полученные и ПС клетки.