Details
| Title | Биотинилирование рекомбинантного стрептавидина в клеточных фракциях E.coli: магистерская диссертация: 03.04.02 |
|---|---|
| Creators | Зотова Дарья Викторовна |
| Scientific adviser | Сергеев Владимир Ремирович ; Поляков Д. С. |
| Organization | Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого. Институт промышленного менеджмента, экономики и торговли |
| Imprint | Санкт-Петербург, 2017 |
| Collection | Выпускные квалификационные работы ; Общая коллекция |
| Subjects | Белки ; Клетка (биол) ; активный стрептавидин ; стрептавидин-биотиновый комплекс ; биотинилирование ; пептиды |
| UDC | 577.164.187(043.3) |
| Document type | Master graduation qualification work |
| File type | |
| Language | Russian |
| Level of education | Master |
| Speciality code (FGOS) | 03.04.02 |
| Speciality group (FGOS) | 030000 - Физика и астрономия |
| DOI | 10.18720/SPBPU/2/v18-652 |
| Rights | Доступ по паролю из сети Интернет (чтение, печать, копирование) |
| Record key | RU\SPSTU\edoc\52703 |
| Record create date | 4/27/2018 |
Allowed Actions
–
Action 'Read' will be available if you login or access site from another network
Action 'Download' will be available if you login or access site from another network
| Group | Anonymous |
|---|---|
| Network | Internet |
Целью работы является получение активного рекомбинантного стрептавидина без использования денатурации и ренатурации получаемого белка. В качестве вектора для экспрессии стрептавидина использовалась плазмида pET22b(+), для наработки бактериальной массы использовались штаммы E.coli BL21(DE3) и BL21(DE3)pLysS. Стрептавидин, полученный с помощью генетической конструкции с PelB-лидерным пептидом, локализируется в различных фракциях E.coli в зависимости от температурного режима индукции синтеза белка IPTG. При температуре индукции 26°С активный стрептавидин локализируется в значимом количестве в культуральной среде. При температуре индукции 16°С активный стрептавидин локализируется в значимом количестве в растворимой фракции клетки. Стрептавидин, полученный с помощью генетической конструкции без pelB-лидерного пептида, в значительном количестве найден в тельцах включения. При использовании штамма продуцента E.coli BL21(DE3)pLysS для синтеза стрептавидина сцепленного с pelB-лидерным пептидом не удалось выделить целевой белок ни из одной клеточной фракции, ни из культуральной среды. Активный стрептавидин использован для получения конъюгатов с пероксидазой хрена.
| Network | User group | Action |
|---|---|---|
| ILC SPbPU Local Network | All |
|
| Internet | Authorized users SPbPU |
|
| Internet | Anonymous |
|
Access count: 543
Last 30 days: 0
