Детальная информация

Зотова, Дарья Викторовна. Биотинилирование рекомбинантного стрептавидина в клеточных фракциях E.coli [Электронный ресурс]: магистерская диссертация: 03.04.02 / Д. В. Зотова; Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого, Институт физики, нанотехнологий и телекоммуникаций ; науч. рук. Д. С. Поляков, В. Р. Сергеев. — Электрон. текстовые дан. (1 файл : 1,30 Мб). — Санкт-Петербург, 2017. — Загл. с титул. экрана. — Свободный доступ из сети Интернет (чтение, печать, копирование). — Adobe Acrobat Reader 7.0. — <URL:http://elib.spbstu.ru/dl/2/v18-652.pdf>. — <URL:http://doi.org/10.18720/SPBPU/2/v18-652>.

Дата создания записи: 27.04.2018

Тематика: Белки; Клетка (биол); активный стрептавидин; стрептавидин-биотиновый комплекс; биотинилирование; пептиды

УДК: 577.164.187(043.3)

Коллекции: Выпускные квалификационные работы; Общая коллекция

Ссылки: DOI

Разрешенные действия: Прочитать Загрузить (1,3 Мб) Для чтения документа необходим Flash Player

Группа: Анонимные пользователи

Сеть: Интернет

Аннотация

Целью работы является получение активного рекомбинантного стрептавидина без использования денатурации и ренатурации получаемого белка. В качестве вектора для экспрессии стрептавидина использовалась плазмида pET22b(+), для наработки бактериальной массы использовались штаммы E.coli BL21(DE3) и BL21(DE3)pLysS. Стрептавидин, полученный с помощью генетической конструкции с PelB-лидерным пептидом, локализируется в различных фракциях E.coli в зависимости от температурного режима индукции синтеза белка IPTG. При температуре индукции 26°С активный стрептавидин локализируется в значимом количестве в культуральной среде. При температуре индукции 16°С активный стрептавидин локализируется в значимом количестве в растворимой фракции клетки. Стрептавидин, полученный с помощью генетической конструкции без pelB-лидерного пептида, в значительном количестве найден в тельцах включения. При использовании штамма продуцента E.coli BL21(DE3)pLysS для синтеза стрептавидина сцепленного с pelB-лидерным пептидом не удалось выделить целевой белок ни из одной клеточной фракции, ни из культуральной среды. Активный стрептавидин использован для получения конъюгатов с пероксидазой хрена.

Права на использование объекта хранения

Место доступа Группа пользователей Действие
Локальная сеть ФБ СПбПУ Все Прочитать Печать Загрузить
-> Интернет Все Прочитать Печать Загрузить

Статистика использования документа

stat Количество обращений: 344
За последние 30 дней: 25
Подробная статистика