Данная работа посвящена изучению роли E3-убиквитинлигазы Pirh2 в регуляции аутофагии в клетках рака легкого. При помощи вестерн-блот анализа, а также иммуноцитохимического окрашивания мы показали, что Pirh2 способствует накоплению LC3II – ключевого маркера аутофагии в клетках. Используя флуоресцентный краситель LysoTracker Red мы подтвердили, что нокдаун Pirh2 вызывает подавление аутофагии в клеточных линиях рака легкого. Одновременно с этим мы обнаружили, что нокдаун Pirh2 вызывает снижение экспрессии генов, вовлеченных в регуляцию всех стадий аутофагии. Также было продемонстрировано, что клетки с пониженной экспрессией Pirh2 оказались более чувствительны к терапии доксорубицином по сравнению с контрольными клеточными линиями.В результате нами была описана новая функция E3-убиквитинлигазы Pirh2, заключающаяся в регуляции аутофагии в клетках рака легкого.

The given work is devoted to impact of Pirh2 in regulation of autophagy flux in non-small cell lung cancer cell. Here we demonstrate that knockdown of Pirh2 decreased the expression of genes involved in all steps of autophagy. Also we have found that Pirh2 enhanced the accumulation of LC3II in lung cancer cell lines. We have confirmed these findings by immune fluorescent microscopy and flow cytometry with LysoTracker Red dye. In addition we have observed that Pirh2 caused resistance to doxorubicin treatment in A549 cell line. Therefore we have discovered a novel role of E3 ligase Pirh2 in the regulation of autophagy in lung cancer cell.